头上白癜风怎么治 http://pf.39.net/bdfyy/zjdy/150516/4624559.html感恩在心感谢有你
支原体qPCR检测不仅用于细胞培养的支原体筛查，也用于生物制品行业的放行检测，但前提是要有方法验证。
无论是否遵循药典，支原体qPCR检测的结果判定都需要一定的标准。下面小编结合德国MB厂家的支原体qPCR说明书及相关文件，给予进一步的阐释。
一、荧光检测通道的结果诠释
用MB公司的qPCR试剂盒检测时，qPCR仪的FAM通道检测支原体荧光信号，HEX通道检测内控对照（简称IC）的荧光信号（如没有HEX通道，可用VIC通道）。IC是用于监测qPCR反应是否正常。对于这两个通道，Ct＜40为阳性结果。Ct≥40为阴性结果。支原体DNA和IC存在信号的竞争性抑制。
在阴性对照和阳性对照均结果正常的前提下，根据FAM?通道和HEX通道的检测结果，可判别样品是否有支原体污染。具体见下表：
表1.FAM?通道(支原体)和HEX?(IC)通道的结果诠释
检测支原体
FAM?通道
内控对照
HEX?通道
结果说明
+
+或-
支原体阳性
-
-
结果无效，需重新检测
-
+
支原体阴性
需要说明的是：
内控对照可在支原体DNA抽提时加入。如果结果无效，则说明抽提失败，或者qPCR存在抑制。如果内控对照是在qPCR反应时加入，则说明qPCR存在抑制。
二、对照与样品的结果诠释（适用于符合EP/JP的检测）
对于遵循EP/JP的检测，具体数据诠释见表2。
样本
结果
意义
进一步的行动
无模板对照
阴性
PCR有效
分析样本数据
阳性
PCR有污染
再重复PCR，检查污染来源（如预混液、水、仪器）
阳性对照
阴性
PCR失败
重复PCR，检查反应失败原因（如漏加试剂、试剂陈旧、加样错误，PCR程序错误）
阳性
PCR有效
分析样本数据
阴性对照
阴性
PCR有效
分析样本数据
阳性
抽提或PCR有污染
重复抽提和PCR，检查污染来源（如缓冲液、预混液、水、仪器），同时，如果无模板对照为阳性，应考虑为PCR污染，应再重复PCR
样本
阴性（0/2）
无污染
生物制品放行
阳性（1/2）
可能有污染
包括抽提在内的全部过程需要重复以评估潜在污染。如果同时无模板对照为阳性，考虑为PCR污染，应再重复实验。模棱两可的结果会影响产品放行。
阳性（2/2）
有污染
生物制品不放行
表2.结果判定的前提是：qPCR检测试剂盒符合EP/JP的要求。三、MB公司支原体qPCR试剂盒(经典法)
德国MB公司的支原体qPCR检测试剂盒(经典法)(英文名：Venor?GemqEP)经过厂家全面的方法验证，符合欧洲药典/日本药典要求，适合细胞治疗，CAR-T，抗体药、疫苗等临床项目申报和质检。
需注意样本要先做DNA抽提，再进行qPCR检测。MB还提供用于PCR/qPCR方法验证的配套的支原体10CFU、CFU菌株标准品、特异性验证用支原体基因组DNA和细菌基因组DNA、支原体DNA绝对定量标准品（基因组拷贝数经严格标定）。
四、德国MB公司介绍
德国MB公司，全称MinervaBiolabs，是世界著名的微生物污染控制公司，成立于年，总部位于德国柏林。
公司创始人来自于全球闻名的罗伯特?科赫微生物研究所。
二十年来，MB公司专注于微生物污染检测与清除，
特别是支原体和*团菌的技术和产品，在世界上遥遥领先。
1.自年起即研发细胞培养和生物药工业用QC检测试剂
2.配备生物安全二级实验室
3.GMP级洁净车间生产
4.世界最大的支原体PCR检测试剂供应商
5.IOM和PDA成员
6.ISO和ISO认证
注：IOM全称InstituteofMedicine
PDA全称ParenteralDrugAssociation
年，上海威正翔禹生物科技有限公司作为MB公司的全国总代理，将支原体检测防控的优秀产品引入中国。十几年来，不断为中国生物研究实验室，以及众多生物制药企业，提供了完整高效的支原体等微生物检测及祛除解决方案。
想了解更多关于产品的信息可
公司网站：
